Thermo Scientific™ PaeI (SphI) (10 U/l)

Beschreibung

Lambda-DNA verdaut mit PaeI (SphI), 0,7 % Agarose, 6 Spaltstellen

Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.

5'...G C A T G▵C...3'

3'...C▵G T A C G...5'

Bedingungen für 100 % Aktivität:

• 1x Puffer B: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 37°C), 10 mM MgCl₂ und 0,1 mg/ml BSA
• Bei 37°C inkubieren

Lagerungspuffer:

• PaeI wird geliefert in: 10 mM Kaliumphosphat (pH 7,0 bei 25°C), 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,15 % Triton X-100, 0,5 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin

Ligation und erneutes Schneiden:

• Nach 50-fachem Verdau mit PaeI können über 95 % der DNA-Fragmente ligiert und erneut geschnitten werden

Methylierungseffekte:

• Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
• Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
• CpG: möglicherweise Überlappung — keine Auswirkung
• EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoBI: möglicherweise Überlappung — blockiert

Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA:

• Es sind mindestens 5 Units der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich

Kompatible Enden:

• Hin1II, XceI