IBA Lifesciences CD4+ CD25+ CD45RA+ Treg Fab Streptamer™ Trenn-Kit MB

Beschreibung

• Strep-Tactin™ Magnetic Microbeads für Fab Streptamers™; 4 Röhrchen für 5 x 10⁸ je Zelle
• CD4 Fab-Strep, human, zur Isolierung von T-Zellen, 1 Fläschchen für 1 x 10⁹ Zellen
• CD25 Fab-Strep, human, zur Isolierung von T-Zellen, 1 Fläschchen für 5 x 10⁸ Zellen
• CD45RA Fab-Strep, human, zur Isolierung von T-Zellen, 1 Fläschchen für 5 x 10⁸ Zellen
• Biotin-Stammlösung für Streptamer™-Technologie; 3 x1 ml
• Puffer-IS, Streptamer™ Waschpuffer, 10 x konzentriert; 2 x 50 ml
• Die Isolierung humaner zentraler CD4+ CD25+ CD45RA+-T-Gedächtniszellen erfolgt durch serielle dreifache positive Selektion. In einem ersten Schritt werden PBMCs mit magnetischen CD4 Fab Streptamers™ markiert. Markierte Zellen werden in einem starken Magneten (StrepMan, horizontale Position) isoliert, wo sie zur Röhrchenwand an der Magnetseite wandern. Diese CD4-positive Zellfraktion wird gesammelt, und Zellen werden von allen Kennzeichnungsreagenzien befreit, indem Biotin in einem starken Magneten hinzugefügt wird (StrepMan, aufrechte Position). Die magnetischen Streptamers™ wandern zur Röhrchenwand, und die Zellen ohne Markierung verbleiben im Überstand. Biotin wird durch Waschen beseitigt. Die reinen und markierungsfreien positiven CD4-Zellen werden nach dem gleichen Verfahren einer zweiten positiven Selektion mit magnetischen CD25 Fab Streptamers™ unterzogen. Die CD4+ CD25+-T-Zellen werden dann einer dritten positiven Selektion mit CD45RA Fab Streptamers™ unterzogen.
• Das daraus resultierende Zellpräparat ist wird mit zentralen CD4+ CD25+ CD45RA+-T-Gedächtniszellen mit einem Reinheitsgrad von über 90 % stark angereichert. Keine Depletionsschritte und keine Säulen erforderlich.