Thermo Scientific™ MboII (5 U/μL)

Beschreibung

Lambda-DNA (dam-) verdaut mit MboII, 1,4 % Agarose, 130 Spaltstellen

Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.

5'...G A A G A (N)₈▵...3'

3'...C T T C T (N)₇▵...5'

Bedingungen für 100 % Aktivität:

• 1x Puffer B: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 37°C), 10 mM MgCl₂ und 0,1 mg/ml BSA
• Bei 37°C inkubieren

Lagerungspuffer:

• MboII wird geliefert in: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 25°C), 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin

Methylierungseffekte:

• Dam: möglicherweise Überlappung — blockiert
• Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
• CpG: möglicherweise Überlappung — keine Auswirkung
• EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoBI: möglicherweise Überlappung — keine Auswirkung

Hinweis:

Mit Lambda-DNA (dam) (#SD0021) analysiert. MboII wird durch überlappende dam-Methylierung blockiert. Verwenden Sie zur Vermeidung von dam-Methylierung einen dam,dcm--Stamm wie z. B. GM2163 (Nr. M0099). Ein mehr als 15-facher Überverdau mit MboII kann zu Star-Aktivität führen. MboII erzeugt DNA-Fragmente mit Single Base 3-Extension, die schwieriger zu ligieren sind als Fragmente mit stumpfem Ende. Nach dem Verdau kann MboII an die gespaltene DNA gebunden bleiben. Dies kann eine DNA-Bandenverlagerung während der Elektrophorese zur Folge haben. Verwenden Sie zur Vermeidung atypischer DNA-Bandenmuster die 6X DNA Ladefarbstoff & SDS-Lösung für die Probenvorbereitung, oder erhitzen Sie vor der Elektrophorese die verdaute DNA in Gegenwart von SDS.