Thermo Scientific™ SatI (Fnu4HI) (10 U/μL)

Beschreibung

Lambda-DNA verdaut mit SatI (Fnu4HI), 1,4 % Agarose, 380 Spaltstellen

Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.

3'...C G N▵C G...5'

Bedingungen für 100 % Aktivität

• 1x Puffer G:10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 37 °C), 10 mM MgCl₂, 50 mM NaCl und 0,1 mg/ml BSA
• Bei 37 °C inkubieren

Lagerungspuffer

• SatI wird geliefert in:10 mM Tris-HCl (pH 7,4 bei 25 °C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin

Ligation und erneutes Schneiden

• Nach 50-fachem Verdau mit SatI können über 60 % der DNA-Fragmente in einem Reaktionsgemisch aus 10 bis 30 U T4 DNA-Ligase/1 μg Fragmente und 10 % PEG ligiert werden
• Mehr als 90% davon können erneut geschnitten werden

Methylierungseffekte

• Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
• Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
• CpG: möglicherweise Überlappung — blockiert
• EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoBI: keine Überlappung — keine Auswirkung

Kompatible Enden

• GC^SGC — BcnI, Bme1390I
• GC^WGC — MvaI, Bme1390I

Hinweis:

Mindestens zwei Kopien der SatI (Fnu4HI)-Erkennungsstelle sind für eine effiziente Spaltung erforderlich.