Thermo Scientific™ EZ-Link™ Phosphine-PEG3-Biotin

Die Phosphingruppe reagiert mit einem Azid, um ein aza-ylide-Zwischenprodukt zu erzeugen, das eingeschlossen ist, um eine stabile, kovalente Amidbindung zu bilden, die auch als Staudinger-Reaktion bezeichnet wird. Die Azidgruppen, das reaktive Ziel der Phosphin-aktivierten Biotin, können über Azid-Reagenzien oder durch In-vivo-Markierung mit Azid-Derivaten natürlich vorkommender metabolischer Bausteine in Proteine oder andere zelluläre Ziele eingebracht werden. Da weder Phosphine noch Azide in biologischen Systemen vorhanden sind, bilden sie chemoselektive (gegenseitig spezifische) Ligationspaare zur Markierung und Konjugation. In Kombination mit Azid-Markierungsstrategien ermöglicht Phosphin-PEG₃-Biotin die direkte Biotin-Markierung, um den Nachweis oder die Affinitätsreinigung von Proteininteraktionen und post-translationalen Modifikationen mithilfe von Streptavidin-Sonden oder Streptavidin-Agaroseharzen zu erleichtern.

Leistungsmerkmale:

• Löslich: gut löslich in wassermischbaren Lösungsmitteln (z. B. DMSO) für die anschließende Verdünnung in wässrigen Reaktionsgemischen mit Zelllysaten und anderen biologischen Proben.

• Kompatibel: Die Reaktionschemie tritt effektiv unter einfachen Pufferbedingungen auf. Es sind keine Hilfsreagenzien wie Kupfer oder Reduktionsmittel erforderlich.

• Chemoselektiv: In biologischen Proben ist die reaktive Phosphingruppe spezifisch für Azid-markierte Moleküle. Dies garantiert die Spezifität der Biotinylierung.

• PEG-Spacer: Der Polyethylenglykol-Spacerarm trägt zur Aufrechterhaltung der Löslichkeit markierter Moleküle bei und reduziert die sterische Hinderung für die Affinitätsbindung an Avidin, Streptavidin oder NeutrAvidin-Protein.